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News Center一、概述：在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化是一種重要的翻譯后修飾，由特定位點的蛋白質(zhì)激酶催化把磷酸基團(tuán)從一個化合物轉(zhuǎn)移到另一個化合物上的過程。調(diào)控著細(xì)胞的基本進(jìn)程，如細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞生長和分化等。質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)的磷酸化位點是利用蛋白質(zhì)經(jīng)過胰蛋白酶消化后，純化出磷酸化多肽，質(zhì)譜鑒定出磷酸化位點。二、技術(shù)優(yōu)勢：與傳統(tǒng)的western鑒定磷酸化相比，通過質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)的磷酸化位點可以定位到氨基酸。三、技術(shù)服務(wù)流程：1、質(zhì)譜鑒定(蛋白鑒定)樣品的制備：利用磷酸化抗體免疫共沉淀沉淀出磷酸化蛋白質(zhì)...
技術(shù)原理：SILAC（定量蛋白質(zhì)組學(xué))的基本原理是分別用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素(重型)標(biāo)記的必需氨基酸取代細(xì)胞培養(yǎng)基中相應(yīng)氨基酸，細(xì)胞經(jīng)5-6個倍增周期后，穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸摻入到細(xì)胞新合成的蛋白質(zhì)中替代了原有氨基酸。不同標(biāo)記細(xì)胞的裂解蛋白按細(xì)胞數(shù)或蛋白量等比例混合，經(jīng)分離、純化后進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，根據(jù)一級質(zhì)譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進(jìn)行相對定量。屬于體內(nèi)代謝標(biāo)記法。技術(shù)特點：SILAC(定量蛋白質(zhì)組學(xué))是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù)，穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸與天然氨基酸化學(xué)性質(zhì)...
Co-ip染色質(zhì)免疫共沉淀準(zhǔn)備工作：1.用預(yù)冷的PBS洗滌細(xì)胞兩次，后一次吸干PBS;2.Co-ip染色質(zhì)免疫共沉淀加入預(yù)冷的RIPABuffer(1ml/107個細(xì)胞、10cm培養(yǎng)皿或150cm2培養(yǎng)瓶，0.5ml/5×106個細(xì)胞、6cm培養(yǎng)皿、75cm2培養(yǎng)瓶)3.Co-ip染色質(zhì)免疫共沉淀用預(yù)冷的細(xì)胞刮子將細(xì)胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶上刮下，把懸液轉(zhuǎn)到1.5EP管中，4℃，緩慢晃動15min(EP管插冰上，置水平搖床上)4.4℃，14000g離心15min，立即將上清轉(zhuǎn)移到一...
常規(guī)的病理形態(tài)學(xué)檢測服務(wù)檢查1.病理形態(tài)學(xué)檢測服務(wù)-脫落細(xì)胞學(xué)檢查常用的有分泌物涂片檢查子宮頸癌，痰涂片檢查肺癌，胸、腹水離心后作涂片檢查胸腔或腹腔的原發(fā)或轉(zhuǎn)移癌和尿液離心后涂片檢查泌尿道腫瘤等。我國醫(yī)務(wù)工作者研制成食管細(xì)胞采取器(食管拉網(wǎng)法)檢查食管癌及賁門癌(陽性確診率為87.3%～94.2%)。還用鼻咽乳膠球細(xì)胞涂片、負(fù)壓吸引細(xì)胞法及泡沫塑料海綿涂片法等采取鼻咽分泌物檢查鼻咽癌，提高了陽性診斷率(陽性率為88%～92%)。用胃加壓沖洗法采取胃內(nèi)容物檢查胃癌，也使陽性診斷...
本微量基因組DNA提取試劑盒采用可以特異性結(jié)合核酸的離心吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng)，樣品裂解后，DNA在高鹽條件下與硅膠膜特異結(jié)合，在低鹽，高pH值時DNA從硅膠膜上洗脫下來。本微量基因組DNA提取試劑盒用于從組織等微量樣品中提取基因組DNA和線粒體DNA，也可以用于從其它方式獲得的基因組DNA的純化，所得基因組DNA可直接用做PCR模板、酶切等分子生物學(xué)實驗。產(chǎn)品特點：1、無RNA酶污染：無需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA，避免實驗室遭受外源RNA酶污染。2、速...
Chip/Co-IP/Chip-seq的準(zhǔn)備工作：預(yù)冷PBS，RIPABuffer，細(xì)胞刮子(用保鮮膜包好后，埋冰下)，離心機1.用預(yù)冷的PBS洗滌細(xì)胞兩次，后一次吸干PBS;2.加入預(yù)冷的RIPABuffer(1ml/107個細(xì)胞、10cm培養(yǎng)皿或150cm2培養(yǎng)瓶，0.5ml/5×106個細(xì)胞、6cm培養(yǎng)皿、75cm2培養(yǎng)瓶)3.用預(yù)冷的細(xì)胞刮子將細(xì)胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶上刮下，把懸液轉(zhuǎn)到1.5EP管中，4℃，緩慢晃動15min(EP管插冰上，置水平搖床上)4.4℃，1400...
注意事項：1.肝素抗凝血直接PCR試劑盒的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到2,000xg，并配備容納15ml離心管轉(zhuǎn)頭的傳統(tǒng)臺式離心機。2.用戶需自備異丙醇和70%乙醇。3.典型的產(chǎn)量1ml全血可提取出25-50μg基因組DNA(不同樣品尤其疾病樣品中中白細(xì)胞數(shù)量差異可能非常大，因此產(chǎn)量的個體差異也可能非常大)。4.本肝素抗凝血直接PCR試劑盒為溶液型，可以很容易的按照比例擴(kuò)大或者縮小每次處理的全血量(20μl-10ml)，請索取其它處理量的操作手冊。5.本肝素抗凝血直...
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